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      • 可溶性淀粉合成酶(SSS)活性檢測試劑盒
      產品名稱:

      可溶性淀粉合成酶(SSS)活性檢測試劑盒

      產品品牌: 索萊寶 價格:
      廠商性質: 生產廠家 產品時間: 2019-03-07
      可溶性淀粉合成酶(SSS)活性檢測試劑盒:SSS(EC 2.4.1.21)通常以游離態存在于質體基質中,催化淀粉鏈延長,主要負責支鏈淀粉的合成。

      產品概述

      品牌SOLARBIO/索萊寶貨號BC1855
      規格100T/96S供貨周期現貨
      主要用途可溶性淀粉合成酶活性測定

      可溶性淀粉合成酶(SSS)活性檢測試劑盒

      注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定。

      貨號:BC1855

      規格:100T/96S

       

      產品內容:

      提取液液體100mL×1瓶,4℃保存;

      試劑一:30mL×1瓶,4℃保存;

      試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存; 

      試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;

      試劑四:粉劑×2瓶,-20℃保存;臨用前加入5mL試劑一充分混勻備用;

      試劑五:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入10mL試劑一充分混勻備用;

      試劑六:粉劑×1支,-20℃保存;臨用前加入500μL雙蒸水,充分溶解備用;

      試劑七:液體250μL×2支,-20℃保存;

      試劑八:液體12.5μL×2支;每支臨用前加入溶解好的4mL試劑四。

      反應液的配制:臨用前在試劑二中加入14mL試劑一,緩慢加熱,逐漸升溫使其溶解,冷卻后將其加入試劑三混合溶解。這樣可以分兩批配制并且測定。

       

      產品說明:

          SSS(EC 2.4.1.21)通常以游離態存在于質體基質中,催化淀粉鏈延長,主要負責支鏈淀粉的合成。

          SSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應,將葡萄糖分子轉移到淀粉引物上,同時生成ADP,在反應體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH,NADPH生成量與前一步反應中ADP生成量呈正比,340nm下測定NADPH增加量即可計算SSS活性。

       

      需自備的的儀器和用品:

           紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、研缽、冰和蒸餾水。

       

      操作步驟:

      一、粗酶液制備

          稱取約0.1g組織加入1mL提取液,冰浴中勻漿。10000g ,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

      二、測定步驟

      1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長340nm,蒸餾水調零。

      2、在EP管中按順序加入下列試劑

      試劑名稱(μL)

      測定管

      樣本

      100

      反應液Ⅰ

      135

      混勻,30℃保溫20 min,置沸水浴中1 min(蓋緊,防止水分散失),冰浴冷卻

      試劑八

      75

      混勻,30℃保溫30 min,置沸水浴中1 min(蓋緊,防止水分散失),冰浴冷卻,10000g 常溫離心10min,取上清液(如果一次性測定樣本較多,可以將試劑四、五和六按比例配成混合液)。37℃預熱試劑五和上清液。

      上清液

      150

      試劑五

      100

      試劑六

      5

      試劑七

      5

      混勻后立即取出200μL于微量石英比色皿或96孔板中,立即在340 nm波長下記錄初始吸光度A1和 2min后的吸光度A2,計算ΔA=A2-A1。

      注意:試劑二如有沉淀,加入之前要使之充分溶解混勻。

       

      三、SSS活性計算

      a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下:

      1、按樣本蛋白濃度計算:

      單位的定義:每mg組織蛋白在反應體系中每分鐘催化產生1nmol NADPH定義為一個酶活力單位。

      SSS(U/mg prot)=[ΔA÷(ε×d)×V測]÷(Cpr×V樣÷V反總×V上清) ÷T=432×ΔA÷Cpr

      此法需要自行測定粗酶液蛋白質濃度。

      2、按照樣本鮮重計算

      單位的定義:每g組織在反應體系中每分鐘催化產生1nmol NADPH定義為一個酶活力單位。

      SSS活性(U/g 鮮重)=[ΔA÷(ε×d)×V測×109]÷(W÷V提取×V樣÷V反總×V上清) ÷T=432×ΔA÷W 。

      V測:測量體積,0.26m L;V樣:加入樣本體積,0.1m L;V反總:反應體積,0.31mL;V上清:加入上清液體積,0.15mL;V提?。杭尤胩崛∫后w積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數,6.22×10-3mL/nmoL/cm;d:比色皿光徑,1cm;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣品質量,g。

      b.使用96孔板測定的計算公式如下:

      1、按樣本蛋白濃度計算:

      單位的定義:每mg組織蛋白在反應體系中每分鐘催化產生1nmol NADPH定義為一個酶活力單位。

      SSS活性(U/mg prot)=[ΔA÷(ε×d)×V測]÷(Cpr×V樣÷V反總×V上清) ÷T =720×ΔA÷Cpr

      此法需要自行測定樣本蛋白質濃度。

      2、按照樣本鮮重計算

      單位的定義:每g組織在反應體系中每分鐘催化產生1nmol NADPH定義為一個酶活力單位。

      SSS活性(U/g 鮮重)=[ΔA÷(ε×d)×V測]÷(W÷V提取×V樣÷V反總×V上清) ÷T=720×ΔA÷W

      V測:測量體積,0.26m L;V樣:加入樣本體積,0.1m L;V反總:反應體積,0.31mL;V上清:加入上清液體積,0.15mL;V提?。杭尤胩崛∫后w積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數,6.22×10-3mL/nmoL/cm;d:比色皿光徑,1cm;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣品質量,g。

       

      可溶性淀粉合成酶(SSS)活性檢測試劑盒訂購說明:

      1、絕大部分產品備有現貨,一般情況下都能訂貨當日發貨。 
      2、部分非常用產品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。 
      3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。 
      4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發貨的將于次日安排發貨。
      5、請辦理完貨款后,將底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


      運輸說明:

      極低溫產品:極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
      低溫產品:低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
      常溫產品:常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。

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