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      • 二胺氧化酶測試盒
      產品名稱:

      二胺氧化酶測試盒

      產品品牌: 索萊寶 價格:
      廠商性質: 生產廠家 產品時間: 2019-03-07
      二胺氧化酶測試盒:DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動物(腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等)、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛,其活性與核酸和蛋白合成密切相關,能夠反映腸道機械屏障的完整性和受損傷程度。

      產品概述

      品牌SOLARBIO/索萊寶貨號BC1285
      規格100管/48樣供貨周期現貨
      主要用途二胺氧化酶活性測定

      二胺氧化酶測試盒 微量法

      注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

      貨號:BC1285

      規格:100T/48S

       

      產品內容:

      提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑一:液體 0.25mL×1 支,4℃保存。

      試劑二:液體 2mL×1 管,4℃保存。

      試劑三:液體 1mL×1 管,4℃保存。

       

      產品說明:

          DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動物(腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等)、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛,其活性與核酸和蛋白合成密切相關,能夠反映腸道機械屏障的完整性和受損傷程度。

          DAO催化尸胺產生醛和過氧化氫,外源添加過量的辣根過氧化物酶,催化過氧化氫氧化鄰

      聯茴香胺生成氧化型鄰聯茴香胺,在460nm處有特征吸收峰,通過測定該波長吸光度增加速率,計算DAO活性。

       

      自備實驗用品及儀器:

          天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、蒸餾水。

       

      操作步驟:

      一、粗酶液提?。?/span>

      1. 組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心20min,取上清,置冰上待測。

      2. 細菌、真菌:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

      3. 血清等液體:直接測定。

       

      二、測定操作表:

      1、分光光度計/酶標儀預熱30min,調節波長460nm,蒸餾水調零。

      2、操作表

       

      對照管

      測定管

      粗酶液(μL

      50

      50

      提取液(μL

      128

      108

      試劑一(μL

      2

      2

      試劑二(μL

      20

      20

      試劑三(μL

       

      20

      混勻,37℃水浴30min,微量石英比色皿/96孔板,蒸餾水調零,測定460nm吸光值。ΔA=A測定-A 對照

       

      三、酶活性計算公式:

      a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

      1)按樣本蛋白濃度計算:

           酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。

          DAO 活性(nmol/min/mg prot=A460÷ε×d×V 反總÷V ×Cpr÷T= 18×A 460 ÷Cpr

      2)按樣本質量計算:

          酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。

           DAO 活性(nmol/min/g=A460÷ε×d×V 反總÷V ÷V 樣總×W÷T= 18×A 460 ÷W

      3)按細胞數量計算:

           酶活性定義: pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細胞每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。

      DAO 活性(nmol/min/104cell=A460÷ε×d×V 反總÷V ÷V 樣總×細胞數量)÷T= 18×A460 ÷細胞數量

       (4) 按液體體積計算

           酶活性定義: pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。

          DAO 活性(nmol/min/mL=A460÷ε×d×V 反總÷V ÷T= 18×A460

          ε:氧化型鄰聯茴香胺毫摩爾消光系數:7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V 反總:反應總體積,0.2mL;V 樣:反應中樣本體積,0.05mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr

          樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;T:反應時間,30min

      b.  96 孔板測定的計算公式如下

      1)按樣本蛋白濃度計算:

          酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。

          DAO 活性(nmol/min/mg prot=A460÷ε×d×V 反總÷V ×Cpr÷T= 36×A 460 ÷Cpr

      2)按樣本質量計算:

           酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。

          DAO 活性(nmol/min/g=A460÷ε×d×V 反總÷V ÷V 樣總×W÷T= 36×A460÷W

      3)按細胞數量計算:

            酶活性定義: pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細胞每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。

      DAO 活性(nmol/min/104cell=A460÷ε×d×V 反總÷V ÷V 樣總×細胞數量)÷T   = 36×A460÷細胞數量

      (4) 按液體體積計算

           酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。

          DAO 活性(nmol/min/mL=A460÷ε×d×V 反總÷V ÷T= 36×A460

          ε :氧化型鄰聯茴香胺毫摩爾消光系數:7.5 L /mmol/cm;d96 孔板光徑,0.5cm;V 反總:

          反應總體積,0.2mL;V 樣:反應中樣本體積,0.05mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;T:反應時間,30min

       

      注意事項:

       1、如果OD值小于0.01,適當加大提取用樣本量;OD值大于0.8,粗酶液可適當稀釋,或者減少提取用樣本量。

          2、樣品蛋白質含量需要另外測定。

       

      二胺氧化酶測試盒訂購說明:

      1、絕大部分產品備有現貨,一般情況下都能訂貨當日發貨。 
      2、部分非常用產品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。 
      3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。 
      4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發貨的將于次日安排發貨。
      5、請辦理完貨款后,將底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


      運輸說明:

      極低溫產品:極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
      低溫產品:低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
      常溫產品:常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。

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