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      • ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒
      產品名稱:

      ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒

      產品品牌: 索萊寶 價格:
      廠商性質: 生產廠家 產品時間: 2020-07-22
      ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒:AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中,催化葡萄糖-1-磷酸與ATP反應生成淀粉合成的直接前體ADPG,是植物淀粉生物合成的主要限速步驟

      產品概述

      品牌SOLARBIO/索萊寶貨號BC0435
      規格100管/96樣供貨周期現貨
      主要用途ADPG焦磷酸化酶(AGP)活性測定應用領域醫療衛生,生物產業

      ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒 微量法
      貨號:BC0435
      規格:100T/96S

       

      產品內容:
      提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
      試劑一:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;
      試劑二:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前加入 6.4mL 雙蒸水充分溶解備用;用不完的試劑仍-20℃保存;
      試劑三:粉劑×2 瓶,4℃保存;臨用前加入 2mL 雙蒸水充分溶解備用;用不完的試劑仍-20℃
      保存;
      試劑四:粉劑×2 支,-20℃保存;臨用前每支加入 500μL 雙蒸水充分溶解備用;用不完的試劑-20℃保存;
      試劑五:液體 250μL×2 支,-20℃保存。

       

      產品說明:
          AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中,催化葡萄糖-1-磷酸與 ATP 反應生成淀粉合成的直接前體ADPG,是植物淀粉生物合成的主要限速步驟。
          AGP 催化的逆向反應生成 G1P,在反應體系中添加的磷酸己糖變位酶和 6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化生成 6-磷酸葡萄糖酸和 NADPH,340nm 下測定 NADPH 增加速率,即可計算 AGP 活性。

       

      需自備儀器跟用品
          紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水

       

      操作步驟:
      一、 粗酶液制備
      稱取約 0.1g 組織加入 1mL 提取液,冰浴中勻漿。10000g ,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
      二、 測定步驟
      1、分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上,調節波長 340nm,蒸餾水調零。
      2、在 EP 管中按順序加入下列試劑(如果一次性測定樣本較多,可以將試劑一、二按比例配成混合液 1,將試劑一、三、四和五按比例配成混合液 2)
      試劑名稱(μL)  測定管
      試劑一  40
      試劑二  64
      樣本  8

      混勻,30℃保溫 15 min,置沸水浴中 1 min(蓋緊,防止水分散失),冰浴
      迅速冷卻后加入下列試劑(試劑一、試劑三置 37℃保溫 10min 以上。)
      試劑一  120
      試劑三  40
      試劑四  8
      試劑五  4
      混勻后立即在 340nm 波長下記錄初始吸光度 A1 和 2min 后的吸光度 A2,計算 ΔA=A2-A1。
      三、AGP  活性 計算
      a. 使用微量石英比色皿測定的計算公式如下:
      1、按樣本蛋白濃度計算:
      單位的定義:每 mg 組織蛋白在反應體系中每分鐘催化產生 1nmol NADPH 定義為一個酶活性
      單位。
      AGP 活性(U/mg prot)=ΔA÷ε÷d×V 反總÷T÷(Cpr×V 樣本)=2854×ΔA÷Cpr。
      此法需要自行測定粗酶液蛋白質濃度。
      2、按照樣本鮮重計算
      單位的定義:每 g 組織在反應體系中每分鐘催化產生 1nmol NADPH 定義為一個酶活力單位。
      AGP 活性(U/g 鮮重)=ΔA÷ε÷d×V 反總÷T÷(W×V 樣本÷V 提?。?2854×ΔA÷W。
      T:反應時間,2min;ε:NADPH 消光系數,6.22×10 -3 mL ˙ nmol -1 ˙ cm -1 ;V 反總:反應總體積,
      0.284mL;d:石英比色皿光程,1cm;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;V 樣本:加入的樣本體積,0.008mL;
      V 提?。杭尤氲奶崛∫后w積,1mL;W:樣本鮮重,g。
      b. 使用 96  孔板測定的計算公式如下:
      1、按樣本蛋白濃度計算:
      單位的定義:每 mg 組織蛋白在反應體系中每分鐘催化產生 1nmol NADPH 定義為一個酶活性
      單位。
      AGP 活性(U/mg prot)=ΔA÷ε÷d×V 反總÷T÷(Cpr×V 樣本)=4756×ΔA÷Cpr。
      此法需要自行測定粗酶液蛋白質濃度。
      2、按照樣本鮮重計算
      單位的定義:每 g 組織在反應體系中每分鐘催化產生 1nmol NADPH 定義為一個酶活力單位。
      AGP 活性(U/g 鮮重)=ΔA÷ε÷d×V 反總÷T÷(W×V 樣本÷V 提?。?4756×ΔA÷W。
      T:反應時間,2min;ε:NADPH 消光系數,6.22×10 -3 mL ˙ nmol -1 ˙ cm -1 ;V 反總:反應總體積,
      0.284mL;d:96 孔板光程,0.6cm;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;V 樣本:加入的樣本體積,0.008mL;
      V 提?。杭尤氲奶崛∫后w積,1mL;W:樣本鮮重,g。

       

      ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒 微量法訂購說明:

      1、絕大部分產品備有現貨,一般情況下都能訂貨當日發貨。 
      2、部分非常用產品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。 
      3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。 
      4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發貨的將于次日安排發貨。
      5、請辦理完貨款后,將底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


      ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒 微量法運輸說明:

      極低溫產品:極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
      低溫產品:低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
      常溫產品:常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。

       

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