α-淀粉酶 （AMS） 檢測試劑盒

α-淀粉酶 (AMS) 檢測試劑盒 微量法
貨號：BC0615
規格：100T/48S

產品內容
試劑一：液體 20mL×1 瓶，室溫保存。若有黃色晶體析出，可適當加熱溶解后再用。
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加入 10mL 蒸餾水，置于常溫水中并加熱煮沸，期間不斷攪拌粉劑溶解。
標準品：粉劑×1 支，10mg 無水葡萄糖。

產品說明：
     淀粉水解酶，包括 α-淀粉酶和 β-淀粉酶。α-AL (EC 3.2.1.1)隨機催化淀粉中 α-1,4-糖苷鍵水解，生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖，同時使淀粉的粘度降低，因此又稱為液化酶。
     淀粉水解酶催化淀粉水解生成還原糖，還原糖還原 3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質，在 540nm 有吸收峰；通過測定 540 nm 吸光度增加速率，計算淀粉酶活性。α-AL 耐熱，但是 β-淀粉酶可在 70℃鈍化 15min。因此粗酶液經過 70℃鈍化 15min，就只有 α-AL 能夠催化淀粉水解。

需自備實驗用品：
     酶標儀或分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、96 孔板/微量比色皿、研缽和蒸餾水。

操作步驟
一、 粗酶液提?。?br />稱取約 0.1g 樣本，加 0.8 mL 蒸餾水勻漿；勻漿后在室溫下放置提取 15min，每隔 5min 振蕩 1次，使其充分提??；6000g，室溫離心 10min，吸取上清液并且加蒸餾水定容 10 mL，搖勻，即為淀粉酶原液。
二、測定 步驟和加樣表（在 EP  管中依次加入下列試劑）：
1、分光光度計預熱 30min 以上，調節波長到 540 nm，蒸餾水調零。
2、將葡萄糖標準液稀釋為 1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.015625、0.0078 和 0.0039mg/mL的標準溶液。
3、按操作表依次加入各試劑：
試劑（μL）  對照管  測定管  標準管  空白管
α-淀粉酶原液  75  75  -  -
蒸餾水  -  -  -  75
標 準 溶 液
（mg/mL）
-  -  75  -
70℃水浴 15min 左右，冷卻
試劑一  150  -  -  -
將以上對照管、測定管和試劑二置于 40℃恒溫水浴中保溫 10min 左右
試劑二  75  75  75  75
在 40℃恒溫水浴中準確保溫 5min
試劑一  -  150  150  150
混勻，90℃ 水浴 10min，取 200μL 96 孔板或微量比色皿中，540nm 處讀取對照管、測定管、標準管、空白管的吸光度，分別記為 A 對照、A 測定、A 標準和 A 空白，計算 ΔA 測定=A 測定-A對照，ΔA 標準=A 標準-A 空白。

三、α- 淀粉酶活性計算：
1、標準曲線的繪制
以 ΔA 標準為 y 軸，以標準溶液濃度為 x 軸，繪制標準曲線，得到方程 y=kx+b。將 ΔA 測定帶入方程得到 x（mg/mL）。
2、α-淀粉酶活性的計算
（1）按照樣本質量計算
單位定義：每g 組織每分鐘催化產生1mg 還原糖定義為1 個酶活力單位。
α- 淀粉酶活性(mg/min/g 鮮重)=x×V 樣÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T=2×x÷W
（2）按照蛋白質含量計算
單位定義：每mg 組織蛋白每分鐘催化產生1mg 還原糖定義為1 個酶活性單位。
α-淀粉酶活性(mg/min/mg prot)= x×V 樣÷（V 樣×Cpr）÷T==0.2×x÷Cpr
（3）血清（漿）樣本中α-淀粉酶活性計算
單位定義：每ml血清（漿）每分鐘催化產生1mg 還原糖定義為1 個酶活性單位。
α-淀粉酶活性(mg/ml)= x÷T=0.2×x
V 樣：加入反應體系中樣本體積，0.075 mL；V 樣總：提取液總體積，10 mL； Cpr：樣本蛋
白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；T：反應時間，5min。
當測定的吸光值大于 1.5 時，可以對樣本進行適當稀釋后測定。

α-淀粉酶 (AMS) 檢測試劑盒 微量法訂購說明：

1、絕大部分產品備有現貨，一般情況下都能訂貨當日發貨。 
2、部分非常用產品，需提前1－2日預訂，海外期貨則需要提前3-6周預訂。 
3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化，若有變動以訂貨當日新價格為準。 
4、每日訂單截止時間為16點整，部分城市可到17點整，因超過截止時間造成當日不能發貨的將于次日安排發貨。
5、請辦理完貨款后，將底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

α-淀粉酶 (AMS) 檢測試劑盒 微量法運輸說明：

極低溫產品：極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
低溫產品：低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
常溫產品：常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨，準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。